NGHIÊN CỨU THIẾT LẬP QUY TRÌNH PHÁT HIỆN KÍ SINH TRÙNG PLASMODIUM VIVAX BẰNG KỸ THUẬT REAL – TIME PCR

Mục tiêu: Tối ưu quy trình phát hiện ký sinh trùng P. vivax bằng kỹ thuật Real-time PCR và đánh giá độ nhạy đặc hiệu của phương pháp.

Phương pháp: Tách chiết DNA, tối ưu quy trình PCR tạo đối chứng dương, tối ưu quy trình Real-time PCR sử dụng Taqman Probe phát hiện KSTSR P. vivax. Xác định ngưỡng phát hiện, độ nhạy, độ đặc hiệu của quy trình và đánh giá so sánh với kit thương mại.

Kết quả: Khuếch đại thành công đối chứng dương có kích thước 1,2 kb chủng KST P. vivax. Tối ưu thành công quy trình real-time phát hiện KSTSR P. vivax. Ngưỡng phát hiện của quy trình là 4,138 copies/phản ứng tương đương với 0,1 KST/ µl, độ nhạy và độ đặc hiệu của quy trình là 100%. Có sự tương quan cao giữa kit thị trường với quy trình nghiên cứu với hệ số Cohen’s kappa (K=0,96).

Kết luận: Đã xây dựng và tối ưu thành công quy trình phát hiện kí sinh trùng P. vivax bằng kỹ thuật Real-time PCR và đạt được độ nhạy, độ đặc hiệu tương đương với kit thương mại trên thị trường, tiết kiệm chi phí và thời gian xét nghiệm.

Từ khóa: Sốt rét, Real-time PCR, P. vivax.

Đầu trang

Tải